制备柱流速的分类和最佳设定

　　制备柱流速的分类和最佳设定。高效液相色谱把普通的色谱柱换成制备柱，就是制备液相色谱，两者的区别在于一种以分析为目的，追求的是检测精度，样品承载量非常小。

　　一、制备柱流速的分类

　　1、制备色谱柱中的流速通常有两种表述方式。

　　2、一种是体积流速，即单位时间内流过某截面的流体的体积，单位mL/min，实际的分离过程中多用此来表示流体的速度；

　　3、另一种就是线流速，即流体中任一质点在单位时间内沿管路方向所通过的距离，单位cm/min，该表示方式多用于理论分析。

　　4、在分离纯化过程中应采用最佳流速以期得到最好的分离效果。最佳线流速从根本上是由填料粒径和形状所决定，而最佳体积流速可由最佳线流速与柱子内径的截面积相乘而得到。二者之间可通过色谱柱的内径互相换算。

　　二、制备柱流速的最佳设定

　　1、在快速制备分离的方法开发中，尤其是反相制备，往往需要借鉴高效液相色谱的方法。但是从高效液相的分析方法放大到制备液相的分离方法，许多参数都要做必要的修改。从分析到制备流速的放大，为了保证色谱峰的分离度基本维持不变，线流速往往是不变的。

　　2、在其他条件不变时，分析柱与制备柱最大的差异就是色谱柱的内径不同，一般来说分析柱内径为2~5mm，而制备柱的内径一般都大于10mm，此时两者流速的比值约为色谱柱内径平方的比值，若分析柱内径为5mm时的最佳流速为1mL/min，那么内径为10mm制备柱相应的最佳流速应为4mL/min。

　　3、实际的制备分离中需要综合考虑各种因素，有时为了成功进行分离必须牺牲最佳柱效，因此很难达到理论上的最佳流速。当分离效果不好时，我们要降低流速，低流速会由于纵向扩散效应而降低柱效进而使峰型变差，但样品分离效果相对较好；

　　当分离效果很好时，通常会加大进样量，而且会相应地增加流速，以加快出峰时间，提升分离效率，但过快地流速会产生较强的涡流扩散效应而让柱效降低。制备色谱的填料颗粒一般较大，会导致装柱的效果差，而传质阻力会相应地大很多。受到这些因素的影响，实际上能达到的放大流速仅为理论值的40%~50%。

　　只要注意不超过柱子耐压、保证足够分离度、仪器本身可以做到、流速可以随便提高。高流速还省时间呢。为了能够延长制备柱的寿命，一般留些余量还是要的。