手性柱的作用和常见问题。手性柱通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别,手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。
一、手性柱的作用
1、是由具有光学活性的单体,固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相。通过引进手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异,从而达到光学异构体拆分的目的。
2、要实现手性识别,手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。
二、手性柱的常见问题
1、手性柱中异构体的分离度下降、该怎么办?
分离度下降的原因有可能是色谱柱以外的色谱条件发生了变化,或者色谱柱受损柱效发生了变化。首先查看是否是因为温度、流动相成分等外在因素发生了变化导致分离度下降,如果排除了各种外在因素就有可能是分析柱本身的柱效下降导致的。如果分离度在短时间内急剧下降伴随柱压上升,可能是有强极性溶剂损害了柱子;如果分离度在长时间内慢慢下降,可能是柱头受污染或柱头塌陷,需要更换保护柱或者更换分析柱。
2、正相手性色谱柱柱压高了怎么办?
手性柱压力高的原因有可能是流动相中醇的含量太高,或者液相流路中有堵塞,或者柱头有样品析出,或者填料被压缩柱头塌陷等。针对不同的原因请有针对性的采取相应的措施。如果是流动相中醇含量太高,则需要升高温度或者降低流速。如果液相流路中有堵塞需要排除堵塞。如果柱头有样品析出则需要使用流动相溶解样品以及样品预处理除掉样品中易析出的成分。如果填料被高压压缩柱头塌陷,则需要重新购买新的手性柱。
手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。这些相互作用通过影响包埋复合物的形成,特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。