NH2氨基色谱柱的应用:
需要注意的是,NH2氨基色谱柱的氨丙基键合官能团相比于C18和C8柱的C18和C8官能团更容易发生水解。因此,在使用之前,特别是在反相条件下,需要做好其使用寿命可能较短的心理准备。
在反相条件下使用时,需要特别注意控制pH值范围。pH值越低,水解的风险就越大;同时,流动相中水的比例越高,水解的风险也随之增加。因此,在使用之后以及准备长期存放该柱时,进行必要的清洗并将氨基柱保存在纯有机溶剂中,是非常好的维护措施。
在使用NH2氨基色谱柱分析酸性物质(如果汁中的糖分)时,酸性物质的存在会导致质子的出现,这可能会使带有轻微负电荷的氨基官能团发生质子化。在这种情况下,经过一段时间后,某些分析物的保留特性可能会发生变化,从而表现出柱效下降的现象。
NH2氨基色谱柱的清洁维护
1、在正常情况下使用:
首先,用50倍柱体积的异丙醇进行清洗,由于异丙醇的粘度较高,需适当降低流速;接着,使用50倍的甲醇进行清洗;最后,用异丙醇过渡回常用的正相流动相即可。
2、在通常情况下使用反相条件:
缓冲盐需要及时进行冲洗,不能直接使用纯甲醇来冲洗缓冲盐等,这属于常识,因此不需要特别说明。
用50倍的纯甲醇进行冲洗;接着,使用异丙醇进行过渡,然后用二氯甲烷冲洗色谱柱;最后,再通过异丙醇过渡回甲醇条件。
此外,对于NH2氨基色谱柱的特别维护,还需注意以下几点:
3、面对强酸或强碱环境:若实验中不慎引入了强酸或强碱物质,应立即停止使用,并先用大量去离子水冲洗,以中和酸碱。随后,再用50倍的甲醇进行深度清洗,以去除残留的酸碱物质。最后,同样通过异丙醇过渡回正相流动相。
4、长期闲置的处理:若色谱柱需长期闲置,应先按上述清洗步骤进行彻底清洗,然后将其保存在充满纯甲醇的密封容器中,并存放在阴凉干燥处,以防受潮和氧化。
5、定期检查与更换:使用过程中,应定期检查色谱柱的柱效和分离度,若发现明显下降,应及时更换新的色谱柱,以保证实验结果的准确性和可靠性。
NH2氨基色谱柱作为色谱分析中的重要工具,其正确使用与清洗维护对于保证实验结果的准确性和延长色谱柱的使用寿命至关重要。希望以上内容能为您的实验提供有益的参考。