干货 | HPLC峰型问题之肩峰原因分析

肩峰指的是在流出曲线或吸收曲线的峰上出现的不成峰形的小曲折，形状类似肩膀，故称为肩峰。

肩峰

原因：进样量过大或是样品浓度过高。

解决方法：减少进样量或稀释样品或换用尺寸更大、载样量更高的色谱柱。

原因：样品溶剂和初始比例流动相的溶剂洗脱能力不同或溶解能力较差以及为了样品的溶解性或稳定性加入了一点的缓冲液，缓冲液的酸碱性可能会导致样品转化，从而导致肩峰现象。

解决方法：调整流动相pH或配比；使用初始比例流动相溶解样品；使用溶剂效应消除器；更换缓冲液。

注意：样品要现配现用，避免样品溶解液的有机相比例、pH值发生变化而导致的溶剂效应

原因：样品或者系统中存在同一时间出峰的杂质，干扰主峰峰形。

解决方法：

1.排查杂质干扰来源，判断是由系统引入杂质还是样品引入杂质。

2.若是系统引入杂质，可以通过清洗流动相过滤头；清洗进样针；清洗液相管路；清洗或更换色谱柱、保护柱等。

3.若是样品引入杂质，可以通过优化前处理方法，对于样品进行纯化；选择分离能力更强的色谱柱。

原因：流动相或者进样溶剂中影响样品，干扰主峰峰形

 解决方法：

1.排查流动相及进样溶剂，判断是流动相的问题还是进样溶剂的问题。

2.若是流动相的问题，可以重新配置流动相；是流动相pH在化合物pKa±2范围外。

3.若是进样溶剂的问题，可以使用与初始比例流动相相同的进样溶剂；使用溶剂效应消除器。

原因：由于色谱柱长时间使用后，色谱柱出现坍塌或者、理论塔板数降低造成的。

解决方法：

1.验证色谱柱塔板数，可根据色谱柱的检测报告方法，测试其当前理论塔板数。

2.更换新的色谱柱。