高效液相色谱仪故障问题——压力不稳

栏目:行业资讯 发布时间:2023-08-31
使用高效液相色谱仪的人们也会遇到一些问题,那我们应该怎么解决呢?今天我们就来讲述一下高效液相色谱仪(HPLC)最为常见的故障——压力不稳,小研请教了我们广州研创的技术小哥为大家总结以下原因以及解决方法
还记得小时候经常会遇到电视出现这种情况吗?
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长大之后,使用高效液相色谱仪的人们也会遇到一些问题,那我们应该怎么解决呢?今天我们就来讲述一下高效液相色谱仪(HPLC)最为常见的故障——压力不稳,小研请教了我们广州研创的技术小哥为大家总结以下原因以及解决方法:




刚开机发生压力不稳

一般是在开机的一段时间内出现,往往是流动相在色谱柱内还没有平衡好、柱箱温度还没有恒定。这些都不属于仪器问题,只要多平衡一会就会稳定。



气泡因素

气泡的产生是由于流动相中溶解了空气,在泵压的作用下空气会分离出来,气泡留在泵体内排不出去,它不仅影响到流量的准确,泵压也会不稳,这时我们只要打开排废阀,利用快速冲洗功能很快就能将气泡赶出。想要了解更多排气泡方法,点击蓝色字体查看详解→7大方法手把手教你如何排气泡!
为防止气泡产生,最好的办法就是使用在线脱气装置。没有脱气装置的情况下,流动相要经过脱气处理。超声波震荡是常用的除气泡方法,其操作是将配制好的流动相连容器放入超声水槽中脱气10~20min即可,方法简便易行,又能满足日常实验操作要求,被实验室广泛采用。想要了解更多流动相脱气问题,点击蓝色字体查看详解→流动相脱气要脱干净全部气体吗?



漏液因素

我们可以检查输液泵有没有漏液现象,一般接在泵后的管道漏液会使压力降低,对压力稳定性影响不大。如果泵内柱塞垫或柱塞杆磨损了那就不一样了,它不仅压力上不去、变化大、流量也不足。若后期观察到泵头或冲洗管漏液(有冲洗瓶时液位会升高),柱塞垫或柱塞杆是有问题的。



单向阀不良

当有盐分或者杂质等污染物附着在单向阀内球体和阀体表面时,就会破坏密封性,造成输液的单向性能降低,泵虽然在工作,但会发现输送不好液体,甚至严重时不能输液。从而反映到压力上,表现为严重不稳或没有压力。
解决方法:可以卸下单向阀,用异丙醇超声清洗20分钟。如果有盐份,再用热水超声清洗一遍效果会更好。若清洗后还达不到要求,可将单向阀再接到流路上用大流量异丙醇冲洗。但单向阀的结构比较精细,如果没有把握最好先不要分解清洗,用超声波清洗时要注意摆放的位置防止部件震散,否则装配后效果会不理想。如单向阀内的球体损伤时就只有更换了。



样品溶解问题

如果样品的溶解不充分或者易析出,就会导致柱子中的颗粒物增多,从而导致设备管路堵塞或柱子堵塞,以致压力不稳定。所以检查样品的制备过程,确保样品干净纯净。
柱子堵塞的解决方法:
  1. 增加流动相流速和洗脱时间。
  2. 适当降低温度,让试剂溶解得慢一些。
  3. 流动相使用色谱纯溶液,现配现用,并通过4.5μm滤膜过滤后方可使用。
  4. 如以上方法都不能解决堵塞问题,则需考虑换一根新的手性色谱柱。

系统堵塞的解决方法:用系统分段法检查阻塞的管路,从后向前分别松开接头检查,找到阻塞管路后,应立即拆下来疏导或换新。

注意

不同的液相色谱系统在压力不稳定的原因可能有所不同,针对具体的情况进行排查才能找到准确的原因。高效液相色谱仪压力不稳会对最后的分析结果造成一定影响,所以我们必须要了解造成它压力不稳的原因,以便及时作出调整。