C18色谱柱选择的基本原则:
(1)烷基化处理封口填料的选择可防止碱性化合物拖尾。
(2)选择含碳量高的柱子,增加保留值。
(3)选择较短的柱子。
(4)选用小颗粒填料。
(5)对分子量大的组分选用大孔径填料柱。
C18色谱柱日常使用中的注意事项:
(1)柱子装卸更换时,动作要轻,接头要适度拧紧。必须防止机械振动强烈,以免柱床出现缝隙。
(2)如果仪器用于常规分析,样品种类有限,但分析次数较多,不妨为每种常规分析配置一根专用柱,有助于延长柱的使用寿命。
(3)使用柱温控制装置时,应注意在进入流动后升温。
(4)使用流动相前应进行脱气处理,以免降低柱效率和影响检测。样品溶液应进行适当的预处理和过滤,以减少柱的污染和堵塞。
(5)更换流动相类型时,应注意溶剂的互溶性,防止盐析。
(6)柱的实际操作压力应低于填充时的较高压力,低于高压的一半。
(7)非极性键合相色谱柱,流动相pH应严格控制在一定范围内,以免损坏柱子。
(8)分离分析工作完成后,不得立即停止,色谱分析系统应及时清洗,以去除色谱柱中的杂质。
(9)如果流动相中有盐,先用水充分清洗。如果在流动相中加入胺,用甲醇和磷酸溶液混合溶剂冲洗,不要只用水冲洗。
(10)C甲醇通常用作保存溶剂,以防止柱干裂和损坏。严禁在色谱流路中长时间保留水或缓冲溶液。
(11)选择合适的C18保护柱保护分析柱免受杂质颗粒和不可逆吸附干扰物的影响。保护柱内填料的粒度应尽可能与分析柱填料的粒度一致。