药物研究中液相手性流动相的选择

手性药物是指药物分子结构中引入手性中心后，得到的一对互为实物与镜像的对映异构体。液相色谱法是目前手性药物分离测定的首选方法，本文根据实际工作中出现的手性药物分离问题总结分享，欢迎同行一起探讨。

手性分析关键的一步是流动相的选择，一般采用正相。

使用最多的流动相是：正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇，起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇，正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。

正己烷和正庚烷对样品的分离没有太大影响，不会改变选择性和分离度，不过正庚烷比正己烷对人体的伤害要小很多，但价格是后者的一倍，所以欧美的很多大制药公司多使用正庚烷，而国内多使用正己烷。

乙醇和异丙醇对样品的分离起关键的作用，不同的醇有不同的选择性，改变醇的种类可以改变选择性，最常用的醇类是乙醇和异丙醇。甲醇不使用是因为它和正己烷、正庚烷不互溶，叔丁醇粘度太大，一般作为添加剂配合乙醇或者异丙醇少量使用，提供特殊的选择性，通常能起到意想不到的效果。手性色谱柱

手性流动相里经常需要添加酸或者是碱来调节峰形

常用的酸：乙酸和甲基磺酸

常用的碱：二乙胺和三乙胺，也有用乙醇胺和异丁胺的

流动相里添加酸和碱的浓度一般要求控制在0.2%(体积比)以下，使用的原则一般是酸性样品加酸，碱性样品加碱。

但实际上很多样品是既含酸性基团又含碱性基团，这就要看哪个基团作用强，对于某些含氨基的两性样品，例如苯甘氨酸，甲基磺酸是一个非常好的选择。

有些样品只添加碱或者酸效果不好，可以尝试在样品里同时添加酸碱，以获得漂亮的峰形和良好的分离度。手性药物分离

流动相里添加酸或碱以后，基本上不会提供额外的选择性，但却能提高分离度，因为峰形好了，相同的保留时间内两个峰之间的分离度自然就好了。

做纯度分析检测杂质含量时，一般要求尽量采用低波长，让尽可能多的杂质有紫外吸收；而做手性分析时，我们需要采用尽可能高的波长，来去除在低波长下才有吸收的杂质的干扰。

一般原则是尽量选择样品紫外吸收最好的波长来获得较高的灵敏度，但流动相里如果添加二乙胺，会导致在低波长下基线波动变大，系统难以平衡，则要提高检测波长。

有些样品在高波长下吸收非常差，只能用低波长检测，可以尝试在样品稀释时加入过量的二乙胺(但不宜太多)。