氨基柱的反相使用是怎样的？

氨基柱的反相使用是怎样的？

先用正己烷-乙腈(99:1).5ml/min用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)冲柱子的流速10倍体积。

以0.5ml/min30倍柱体积的流速pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注意pH其值不得超过11.0)，立即用水(0).5ml/min冲洗流速，30倍柱体积)，然后用流动相代替。

制备流动相时，每个组分应单独测量，比例较小的组分应精确测量，需要调整pH精确到0确到0.1。

在反相条件下使用时，应特别注意控制pH值范围，pH值越低，水解风险越大，流动相中水的比例越高，水解风险越大。pH范围在pH3.0-7.0

如果要使用的流动相也含有缓冲盐，建议使用相同比例的流动相过渡，而不含缓冲盐，以避免缓冲盐在分析柱中的沉淀。

在一种情况下，当使用氨基柱分析酸性物质时，酸性物质的存在意味着质子的存在，这可能导致略带负电荷的氨基官能团质子化，导致某些分析物质的保留性质在使用一段时间后发生变化或柱效应降低。建议：使用5-10倍柱体积的0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗柱(当然，多余的氨应该在冲洗后用不含碱的流动相清洗)，然后在分析这种酸性分析时，建议在流动相中加入少许氨，如0.1%。