新购买的色谱柱在使用前需要激活

液相色谱柱的活化操作是常见的C以18反相分析柱为例，甲醇或乙腈等有机溶剂通常在出厂时密封。随着时间的推移，色谱柱中的有机溶剂挥发缓慢，色谱柱中可能出现气泡。因此，新购买的色谱柱在使用前通常需要激活。

下面是常见的4.6mmX150mm,5μm粒径的C18反相分析柱为例：

1.在激活色谱柱之前，应使用相关试剂清洗液相系统的流路，以确保没有污染物残留。切换到密封柱试剂(通常为甲醇或乙腈)，更换流路中的试剂。

2.停止泵，将分析柱的进口与系统连接，去掉出口的堵头，出口与系统不连接。将色谱柱倾斜放置，使其出口高于进口。

3.以0.1ml/min冲洗色谱柱的流速约为5分钟，切换到0.2ml/min继续冲洗流速。观察色谱柱出液口，如果连续出液，停止泵，将色谱柱出液口连接到液相系统。

4.以0.1ml/min流速冲洗色谱柱，5分钟内将流速稳定提升至0.5ml/min继续冲洗色谱柱。

5.以0.5ml/min在冲洗色谱柱的过程中，观察压力和基线是否稳定，直至冲洗总流量达到30柱体积。

6.完成活化。

对于长期未使用的类似型号色谱柱，也可参考上述步骤再次使用前进行激活。