如何提高色谱柱柱效及老化的目的

发布时间:2022-05-27

  色谱柱柱效是色谱柱对色谱中两种物质分离能力的大小,柱效越高,分离效果越好,峰形越好,反之则分离效果差,度峰形差,甚至不能完全分开两个物质,色谱柱的柱效和填料,柱问长,柱内径均有关系,一般来说,填料越细密,柱长径比越大,柱效越高。

  色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标,混合物能否在色谱柱中得到分离,除取决于选择合适的固定相外,还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。

  不过在HPLC中,色谱柱柱效一般出厂后就基本固答定,随着使用过程的损耗而柱效降低,人工填柱的色谱柱,因为每次装柱时所用的溶液,填料量都不尽相同,因此柱效也会有变化,测柱效主要是看柱是否具有良好的分离效果。

  在实际工作中,我们通过对载气流速,进样技术,气化室温度,色谱柱,柱温,检测器温度这六个方面的选择,有效地提高了柱效率,使分析出的色谱峰峰形正常,无峰形扩张,拖尾,峰漏检等不良现象出现,分离度高,从而提高了分析结果的准确性。

  色谱柱所谓柱效就是在较短的时间内,用较短的柱子达到满意的分析结果,为了提高色谱柱的柱效率,减少色谱峰扩张,拖尾及峰漏检等现象.。

  装填好的色谱柱还需要进行老化处理后,才能接至检测器使用,老化的目的有两个:(1)为了彻底除去固定相中残余溶剂和某些挥发性杂质,确保检测器不收污染,使之有较低的本底电流。

  (2)进一步促使固定液均匀地,牢固地分布在载体表面上,可以提高柱效能,老化的方法是:把色谱柱接入载气气路系统(色谱柱为安全起见,一般采用氮气作载气),色谱柱的一端接在汽化室上,另一端放空(不要接在检测器上,防止沾污),用10——20ml/分的载气流速,略高于操作温度10°C—20°C(但要低于固定液的最高使用温度极限)的条件下,通气4—8h甚至24h,基本老化好后,再接上检测器检查,当记录仪基线平直以后,老化过程才算结束,千万注意,上述老化色谱柱的接法,不适用于以氢气作载气老化,否则氢气放空在色谱炉中易发生爆炸事故。

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