氨基柱的使用与维护

栏目:行业资讯 发布时间:2022-03-23
氨基柱是一款既可以正相使用,也可以反相使用,但是我们要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱出厂时保存在正相环境中。

  氨基柱是一款既可以正相使用,也可以反相使用,但是我们要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱出厂时保存在正相环境中。

氨基柱

  1、由于新的氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中,与反相流动相是不互溶的,因此如果使用反相的方法,必须用至少10倍柱体积的异丙醇冲洗过渡(约2h,0.5mL/min),以除去正相保存溶液。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。

  2、再用至少10倍柱体积95%水-5%乙腈(或甲醇)冲洗(不含缓冲盐的流动相可省去)过渡,最后用流动相平衡。

  3、用完后洗柱时,必须先用95%水冲洗至少10倍柱体积,除去所用缓冲盐(不含缓冲盐的流动相可省去)。然后保存于乙腈/水(80:20)溶液(一个月内)中。长期不用的话,建议用异丙醇保存(一个月以上)。

  4、新柱子一定要置换掉保存溶液,用异丙醇保存的柱子在使用前也需要花一定的时间给置换掉。

  5、反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围(根据你色谱柱耐受使用pH),pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。

  6、还有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。